Посев на среду висмут сульфит агар

Эта среда рекомендуется для селективного выделения и предварительной идентификации Salmonella typhi и других сальмонелл из патологического материала, сточных вод, пищевых продуктов, воды и другого исследуемого материала.

Рост Salmonella серовара Enteritidis
Bismuth Sulphite Agar (M027)

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 52,33 г порошка М027 или 40,0 г порошка М1004 в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. НЕ СТЕРИЛИЗОВАТЬ АВТОКЛАВИРОВАНИЕМ И НЕ ПЕРЕГРЕВАТЬ, т.к. это может привести к потере селективности среды.

Селективные свойства среду обеспечивают, главным образом, частицы сульфита висмута, которые надо равномерно распределить перед розливом среды в чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Висмут-сульфитный агар рекомендован многими профессионалами (1, 2, 3, 4, 5, 6) для селективного выделения и предварительной идентификации Salmonella typhi и других сальмонелл из патологического материала, сточных вод, пищевых продуктов, воды и другого исследуемого материала.

Бриллиантовый зеленый и сульфит висмута подавляют рост грамположительных и кишечных грамотрицательных микроорганизмов. Salmonella typhi, Salmonella enteritidis и Salmonella typhimurium обычно образуют на этой среде черные колонии с металлическим блеском, окруженные зоной почернения в результате продукции сероводорода и восстановления сульфита до сульфида железа, имеющего черный цвет. Salmonella paratyphi A образует светло-зеленые колонии. Ввиду высокой селективности среды на нее наносят большой инокулюм (грамположительные и колиформные микроорганизмы активно подавляются). На данной среде может подавляться рост и некоторых сальмонелл, поэтому она не должна быть единственной селективной средой в ходе исследования. На висмут-сульфитном агаре подавляется рост шигелл и таких сальмонелл, как S.sendai, S.berta, S.gallinarum, S.abortus-equi.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий зеленовато-желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 2,0%-ному агаровому гелю (М027) или 1,27%-ному агаровому гелю (М1004).

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет зеленовато-желтую окраску с хлопьевидным преципитатом, опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор М027 (5,23% вес/об) имеет рН 7,7 ± 0,2; водный раствор М1004 (4,0% вес/об) имеет рН 7,6 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 40-48 ч при 35°С.

Источник

Висмут-сульфит-ГРМ агар Оболенск

Питательная среда для выделения сальмонелл, сухая

ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов для бактериологических исследований Питательная среда для выделения сальмонелл сухая Висмут-сульфит-ГРМ агар Оболенск

НАЗНАЧЕНИЕ

Висмут-сульфит-ГРМ агар Оболенск предназначен для бактериологических исследований в санитарной и клинической микробиологии с целью выделения сальмонелл из исследуемого материала.

1. характеристика

Висмут-сульфит-ГРМ агар представляет собой мелкодисперсный, гигроскопичный, светочувствительный порошок светло-желтого цвета, получаемый смешиванием сухих компонентов.

Выпускается в полиэтиленовых банках по 250 г.

2.1. ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ

Свежеприготовленная среда, благодаря бриллиантовой зелени и висмуту лимоннокислому, входящих в состав среды, обладает сильным ингибирующим эффектом в отношении сопутствующей микрофлоры.

Дифференцирующее действие среды основано на том, что образуемый бактериями из сульфата железа сероводород, вызывает почернение индикатора – цитрата висмута – вследствие перехода его в сульфид висмута, вещество черного цвета. Поэтому бактерии, образующие сероводород, формируют черные или черные с коричневым или темно-зеленым оттенком колонии, обладающие часто металлическим блеском. Среда под колониями, при этом, окрашена в черный цвет.

2.2. СОСТАВ

Висмут-сульфит-ГРМ агар представляет собой смесь сухих компонентов из расчета, г/л:

1. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

Висмут-сульфит-ГРМ агар обеспечивает на всех засеянных чашках Петри рост тест-штаммов сальмонелл и их четкую дифференциацию от кишечной палочки не позднее 48 ч инкубации при температуре (37±1) °С. На среде отсутствует рост стафилококков, некоторых клебсиелл, подавляется роение протея и частично рост эшерихий.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

При анализе исследуемого материала – соблюдение СП 1.2.731-99 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV группы патогенности и гельминтами».

ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ

АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Объекты исследований в санитарной и клинической микробиологии.

Проведение АНАЛИЗа

7.1. Приготовление среды Висмут-сульфит-ГРМ агар Оболенск.

Порошок в количестве, необходимом для приготовления конкретной серии, тщательно размешивают в 1 л воды дистиллированной, кипятят при постоянном перемешивании в течение 3 мин до полного расплавления агара. Охлаждают до температуры 45-50 °С, взбалтывают, разливают в нестерильные чашки Петри слоем 4-5 мм и оставляют на рабочем столе с открытыми крышками для застывания и подсушивания среды в течение 90-100 мин при температуре 18-25 °С. Готовая среда в чашках непрозрачная зелено-желтого цвета.

Готовую среду можно использовать в течение 3 суток при температуре хранения от 2 до 25 °С (хранить в защищенном от света месте).

7.2. Взятие, посев инфицированного материала и учет результатов производят в соответствии с «Методическими указаниями по микробиологической диагностике заболеваний, вызванных энтеробактериями» (М., 1984 г) и приказом Минздрава СССР от 22.04.85 г., № 535 «Об унификации микробиологических (бактериологических методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений».

7.3. Исследуемый материал тонким слоем распределить шпателем по поверхности чашек Петри с Висмут-сульфит-ГРМ агаром (при необходимости сделать разведения). Инкубировать при температуре (37±1) °С в течение 24-48 ч.

РЕГИСТРАЦИЯ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ

Учет результатов проводят визуально через 24-48 ч инкубации при температуре
(37±1) °С. Сальмонеллы, продуцирующие сероводород, на Висмут-сульфит-ГРМ агар Оболенск образуют круглые или полиморфные, черные или черные с коричневым или темно-зеленым оттенком колонии, обладающие часто металлическим блеском, и окрашиванием среды под колониями в черный цвет; сальмонеллы, не продуцирующие сероводород, образуют круглые зеленые или темно-зеленые колонии. Колонии эшерихий круглые, зеленовато-коричневые.

Для получения достоверных результатов посевы образцов производить не менее, чем в трех повторностях.

УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ

Висмут-сульфит-ГРМ агар Оболенск необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре от 2 до 30 С.

Срок годности – 3 года. Среда с истекшим сроком годности использованию не подлежит.

Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей инструкции по применению.

По вопросам, касающимся качества Висмут-сульфит-ГРМ агара в течение срока годности следует обращаться в адрес предприятия-изготовителя: 142279 Оболенск, Московская обл., Серпуховский р-н, ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии», тел. (4967) 36-00-20, факс 36-01-16.

Источник

Сульфитный агар висмута: обоснование, подготовка и применение

Содержание:

В агар сульфита висмута это твердая, селективная и дифференцированная питательная среда, специально разработанная для изоляции Salmonella enterica подгруппы enterica серотипа Typhi, среди других видов сальмонелл. Среда известна как агар BSA по аббревиатуре от английского Bismuth Sulfite Agar.

Первоначальная формула сульфитного агара висмута была создана в 1927 году Уилсоном и Блэром (среда, содержащая глюкозу и висмут-сульфит-железо); он содержал сульфит натрия, глюкозу, раствор висмута, цитрат аммония, сульфат железа и агар-агар.

Сегодня существует модификация исходной среды, состоящая из мясного экстракта, мясных и казеиновых пептонов, индикатора сульфита висмута, глюкозы, динатрия фосфата, сульфата железа, ярко-зеленого и агар-агара.

Существует множество способов выделения видов Salmonella, но когда дело доходит до выделения серотипа Typhi, сульфитный висмут-агар имеет заметное преимущество перед ними, поскольку в большинстве случаев достигается очень низкое или нулевое выделение этого микроорганизма. .

Однако при попытке выделить энтеропатогены необходимо использовать более одного типа среды, поскольку агар с сульфитом висмута менее эффективен для других видов Salmonella и рода Shigella, которые подавляются или развиваются очень плохо. в этом агаре.

Следует отметить, что среди всех видов сальмонелл серотип Typhi является одним из наиболее важных энтеропатогенов человека и является его единственным резервуаром. Этот серовар вызывает брюшной тиф, гастроэнтерит, бактериемию и сепсис.

По этой причине целесообразно включать этот агар при анализе проб воды, кала или пищевых продуктов, если есть подозрение на его присутствие.

Основа

Как и большинство питательных сред, сульфитный висмут-агар содержит питательные вещества, способствующие росту бактерий, такие как пептоны и мясной экстракт. Точно так же глюкоза действует как источник энергии и углерода.

Однако не все бактерии будут расти на этой среде, так как агар с сульфитом висмута является селективной средой. Он содержит соединения, подавляющие рост грамположительных микроорганизмов и некоторых грамотрицательных бактерий. Этими соединениями являются: индикаторный сульфит висмута и ярко-зеленый цвет.

Со своей стороны, динатрийфосфат поддерживает осмолярность и pH среды.

Кроме того, агар с сульфитом висмута является дифференциальной средой благодаря присутствию сульфата железа, который показывает образование H₂S. The H₂S, образованный бактериями, реагирует с сульфатом железа и образует хорошо видимый нерастворимый черный осадок.

Наконец, твердую консистенцию среды обеспечивает агар-агар.

Подготовка

Взвешивают 52,3 г обезвоженной среды и растворяют в 1 литре воды. Нагрейте смесь до кипения в течение 1 минуты при частом помешивании до полного растворения. Не перегревайте слишком сильно. Эта среда не подлежит автоклавированию, так как сильная жара повреждает питательную среду.

Дать остыть до 45 ° C и встряхнуть перед подачей в стерильные чашки Петри. Рекомендуется делать пластины хорошей толщины. Для этого в каждую тарелку необходимо налить по 25 мл. Дайте застыть. Поскольку это среда, которая не стерилизуется, предложение ее немедленного использования является нормальным.

Однако исследование, проведенное D’Aoust в 1977 году, показало, что восстановление происходит лучше. Сальмонелла тифимуриум Y Сальмонелла энтеритидис как висмут-сульфитный агар, средний возраст, производительность сероваров не влияет Тиф Y Паратифы Б.

Д’Ауст рекомендует использовать чашки на 4-й день охлаждения, хотя предупреждает, что по мере старения среды селективность снижается, и Proteus vulgaris.

По этой причине для сильно загрязненных образцов, таких как фекалии, предпочтительно использовать свежеприготовленную среду. В противном случае используйте на 4-й день его приготовления. Другие авторы рекомендуют использовать тарелки на следующий день после их приготовления в холодильнике.

Охлажденные пластины перед использованием необходимо закалить. PH среды должен составлять 7,5 ± 0,2. Сырая среда имеет бежевый цвет, а приготовленная среда — зеленовато-серая опалесцирующая.

Приложения

Среди образцов, которые можно засеять в эту среду, есть образцы фекалий, питьевой или сточной воды и продуктов питания.

Для улучшения изолятов рекомендуется провести предварительную обработку лактозным бульоном и после обогащения тетратионатным бульоном или цистинселенитным бульоном перед посевом на сульфитный висмутовый агар.

Планшеты инкубируют при 35 ° C ± 0,2 от 24 до 48 часов при аэробиозе.

Характеристики колоний на сульфитном висмутовом агаре

Колонии Сальмонелла тифа они обычно видны на этом агаре в течение 24 часов с черным центром в окружении ярко-зеленого ореола. А через 48 часов они полностью почернеют из-за образования сероводорода.

Сальмонелла Паратифи А он представляет собой колонии с различными характеристиками. Через 18 часов инкубации можно наблюдать черные, зеленые или прозрачные колонии со слизистой оболочкой. Между тем, через 48 часов они полностью черные, а иногда и с ярко выраженным металлическим блеском.

С. Паратифи А имеет тенденцию затемнять окружающую среду вокруг колонии.

Salmonella sp Они представляют собой черные или серо-зеленые колонии с металлическим блеском или без него, и могут или не могут затемнять окружающую среду.

Штаммы колиформ, как правило, полностью подавлены, но если они растут, то развиваются в виде непрозрачных зеленых или коричневых колоний без металлического блеска. Они не окрашивают среду вокруг колонии.

Ограничение

-Очень слабые инокуляты могут образовывать колонии Сальмонелла тифа светло-зеленого цвета, остается незамеченным, и культура считается отрицательной.

— Агар с сульфитом висмута может ингибировать восстановление некоторых видов сальмонелл, таких как S. sendai, S. berta, S. gallinarum, S. abortus-equi.

-Эта среда подавляет большинство видов рода Shigella.

–S. Typhi и S. arizonae они могут давать очень похожие колонии.

Колиформные бактерии, которые производят H₂S, такие как Proteus и Citrobacter, образуют колонии, похожие на сальмонеллы, поэтому необходимы биохимические идентификационные тесты.

-Для получения изолированных колоний необходимо выполнить хорошую штриховку; это единственный способ наблюдать типичные характеристики колоний рода Salmonella.

QA

Для контроля стерильности неинокулированный планшет инкубируют при 37 ° C, ожидается, что не будет роста или изменения цвета.

Для контроля качества используются известные штаммы, такие как:

кишечная палочка ATCC 25922, Сальмонелла энтеритидис ATCC 13076, Сальмонелла тифа ATCC 19430, Шигелла флекснери ATCC 12022, Enterococcus faecalis АТСС 29212.

Ожидается, что кишечная палочка Y Шигелла флекснери частично ингибируются образованием зеленовато-коричневых и коричневых колоний соответственно. При этом обе сальмонеллы должны иметь отличное развитие с черными колониями с металлическим блеском и, наконец, Enterococcus faecalis он должен быть полностью запрещен.

Ссылки

1. Уилсон, У. и Э. М. Макв. Блэр. Использование глюкозно-висмут-сульфитно-железной среды для выделения Б. тифос а также Б. протей. Журнал гигиены, 1927; 26(4), 374-391. Получено с .jstor.org
2. D’aoust JY. Влияние условий хранения на производительность сульфитного висмутового агара.J Clin Microbiol. 1977; 5 (2): 122–124. Доступно на: ncbi.nlm.nih.gov
3. IVD Laboratories.Висмут-сульфитный агар по WILSON-BLAIR. 2009. Доступно по адресу: BismuthSulfitagar_span_Jan_2009% 20 (2) .pdf
4. Himedia Laboratories. Висмут-сульфитный агар. 2017. Доступно на: himedialabs.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Микробиологический диагноз Бейли и Скотта. 12 изд. Редакция Panamericana S.A. Аргентина.
6. Моралес Р., де ла Круз Д., Лейва Г. и Ибарра М. Бактериологическое качество сырого козьего молока, производимого в Миравалесе, Пуэбла. Преподобный Мекс, Инг Ким 2012; 11(1): 45-54

Классическая древность: периоды и их характеристики

Интервью с Хавьером Элькартом: внимательность как терапевтический инструмент

Источник

Среда №5 агар висмут-сульфит (ГРМ-агар) 0,25 кг

Цена: 5 796.00 RUB

Вы можете добавить товар в корзину, указав количество

Вид упаковки: полиэтиленовая банка

Питательный ГРМ агар № 5 для выделения сальмонелл из исследуемого материала в клинической и санитарной микробиологии, научных исследованиях. Относится к изделиям медицинского назначения с низкой степенью опасности. Входящие в состав бриллиантовый зеленый и висмут лимоннокислый обладают сильным ингибирующим эффектом в отношении сопутствующей колиморфной микрофлоры. Дифференцирующие свойства проявляются на вторые-третьи сутки инкубирования засеянных чашек четкой дифференциацией Salmonella spp. от кишечной палочки. В виде сухого порошка в пластиковых флаконах по 250 гр., рассчитанных на приготовление 4,7 л плотной среды

Функциональное назначение

Дифференцирующее свойство среды основано на способности сальмонелл вызывать почернение индикатора в результате реакции образования сероводорода из сульфата железа, индикатор цитрат висмута изменяется в сульфид висмута — вещество черного цвета. Поэтому бактерии, образующие сероводород, формируют черные или черные с коричневым или темно-зеленым оттенком колонии, обладающие часто металлическим блеском. При этом среда под колониями окрашивается в черный цвет — Salmonella typhi. Salmonella paratuphi — вырастает в виде зеленых колоний с темным центром, Salmonella gallinarum — более мелких темно-зеленых колоний

Технические характеристики

Состав среды: панкреатический гидролизат рыбной муки, дрожжевой экстракт, глюкоза, натрий хлористый, натрий фосфорнокислый двузамещенный, натрий сернистокислый, натрий углекислый, железо сернокислое, бриллиантовый зеленый, висмут лимоннокислый, агар.
В виде гомогенного сухого, легко растворимого порошка светло-желтого цвета.
Готовая среда зеленовато-желтого цвета, непрозрачная.
Кислотность среды: при 25°С имеет рН 7,6 ± 0,2.
Готовую среду используют свежеприготовленной или в течение первых трех суток при температуре хранения +2. 25°C в темном месте.
Форма выпуска: сухой порошок в полиэтиленовых банках по 250 г.
Условия хранения: в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре +2. 30°C.
Срок годности — 3 года с даты производства, указанной на упаковке.
Регистрационное удостоверение № ФСР 2008/0337 от 13.10.2011 г.

Документация и инструкции

Вся представленная на сайте информация, касающаяся технических характеристик, наличия на складе, стоимости товаров, носит ознакомительный характер и ни при каких условиях не является публичной офертой, определяемой положением пунктом 2 статьи 437 Гражданского кодекса Российской Федерации. Всю подробную информацию о товарах, их наличии и стоимости Вы можете получить у менеджеров отдела клиентского сервиса.

На данном сайте используются файлы cookie (куки) в целях совершенствования работы сайта и получения аналитической информации. В случае несогласия, просим произвести соответствующие настройки в браузере или покинуть данный сайт. Оставаясь на www.art-medika.com, Вы принимаете нашу политику конфиденциальности. Заполняя форму заявки, Вы подтверждаете свое согласие на обработку персональных данных.

© 2012-2019 Арт-Медика оборудование, реагенты, изделия медицинского назначения для клинической лабораторной диагностики

Источник