Меню

Определение жизнеспособности семян основано на том что при повреждении растительной ткани



Экология СПРАВОЧНИК

Информация

Работа 5. Определение жизнеспособности семяи по окрашиванию цитоплазмы

Вводные пояснения. При повреждении растительной ткани увеличивается сродство цитоплазмы к красителям. На этом основаны методы определения жизнеспособности семян по окрашиванию их зародышей витальными красителями. Жизнеспособными считаются те семена, зародыши которых не окрашиваются.[ . ]

Порядок работы. Метод Н е л ю б о в а. Этим методом устанавливают жизнеспособность семян гороха, фасоли, люпина, конопли и тыквенных.[ . ]

Берут 10. 15 семян гороха, предварительно намачивают в течение 18 ч при 20 °С, освобождают от семейной оболочки, помещают в 0,2 %-й раствор индиго-кармина на 2.. .3 ч при 30 °С. Затем краску сливают, промывают семена водой и устанавливают их жизнеспособность.[ . ]

Семена с неокрашенными корешками и слабо окрашенными семядолями относят к жизнеспособным. Семена с полностью окрашенными корешками и семядолями признают нежизиеспосббными.[ . ]

Метод Иванова. Для определения берут десять зерновок пшеницы, предварительно намачивают в воде в течение 10 ч при комнатной температуре, разрезают бритвой вдоль бороздки пополам и помещают на 15 мин в 0,2%-й раствор кислого фуксина или 0,1 %-й раствор индиго-кармина, налитый в стаканчик или бюкс. Краску сливают, промывают семена водой, размещают пинцетом на фильтровальной бумаге и определяют жизнеспособность. У жизнеспособных семян зародыши не окрашены, у мертвых или сильно поврежденных окрашены более или менее интенсивно.[ . ]

Зарисовывают жизнеспособные и нежизнеспособные семена. По результатам работы делают выводы.[ . ]

Источник

Определение жизнеспособности семян

Цель работы: выяснить жизнеспособность семян способом окрашивания тканей зародыша.

Задачи работы: приобрести навыки определения жизнеспособности семян с применением красителей.

Пояснение к работе: под жизнеспособностью семян понимается количество живых семян, выраженное в процентах от общего числа семян, забранных для анализа. Способ анализа основан на свойстве ткани зародыша принимать окраску действующих на него красителей. Кое-какие красители окрашивают мертвые клетки, а другие — здоровые. Заключение о жизнеспособности семян делается по площади, интенсивности и месту воспринятой зародышем окраски.

Способом окрашивания пользуются при анализе семян с долгим семенным покоем (семян кедра, клена, липы, ореха, вишни, сливы, яблони, рябины, черемухи) либо при необходимости срочного проведения анализа семян. Его используют и к скоро прорастающим семенам хвойных пород (сосна, ель, лиственница, пихта).

ГОСТом 13066.7-93 установлено применение следующих красителей: раствора индигокармина (окрашивает мертвые клетки зародыша в светло синий цвет), йодистого раствора (окрашивает живые клетки зародышей хвойных пород в светло синий-серый цвет) и раствора тетразола (окрашивает живые клетки клена в красный цвет).

Способ определения жизнеспособности зародышей семян окрашиванием раствором индигокармина основан на том, что живые клетки зародыша непроницаемы для раствора, в то время как мертвые клетки зародыша легко пропускает данный раствор и окрашиваются.

Приготовление раствора: 1 г порошка индигокармина растворяют в 1 л воды и кипятят в течение 30 мин.. После этого раствор фильтруют через предварительно взвешенный фильтр. Остаток не растворившегося индигокармина вместе с фильтром взвешивают и по разности весов устанавливают количество растворившегося индигокармина. Затем в раствор доливают кипяченую воду до получения концентрации 0,05 % (1 г на 2 л воды). Раствор хранят в чёрном месте не более 15 дней.

Отсчитывают 4 много семян из фракции чистых. Перед извлечением зародышей семена намачивают. Срок намачивания для разных пород установлен ГОСТом (к примеру семена кедра намачивают в течение 48 часов). После этого из семян извлекают зародыши. В число 100 штук семян входят и такие, у которых зародыш был недоразвитым, поврежденным насекомыми, очевидно загнившим либо он совсем отсутствует. Такие семена относят к категории нежизнеспособных.

Зародыши замачивают в растворе индигокармина в течение 2 часов. После этого краситель сливают, зародыши промывают и разглядывают.

К жизнеспособным относят (для семян кедра, сосны, ели): а) совсем не окрашенные; б) окрашенные не более, чем на 1/3, начиная от корешка зародыша (рисунок 18);

При анализе жизнеспособности семян яблони, других пород и рябины: а) совсем не окрашенные семена (рисунок 19), б) имеющие окрашенные пятна на семядолях, не превышающие 1/3 их поверхности и расположенные на противоположной стороне от корешка зародыша; в) с поверхностным бледным окрашиванием всего зародыша; г) имеющие чуть заметную окрашенную точку на кончике корешка. К нежизнеспособным относятся все остальные.

Жизнеспособность семян вычисляют как среднее арифметическое из результатов окрашивания четырех проб семян и высказывают в целых процентах.

Читайте также:  Семя льна сколько жиров

Способ определения жизнеспособности зародышей семян раствором тетразола основан на окрашивании им живых клеток. В следствии химических процессов в живых клеток зародыша образуется нерастворимое вещество — формазан красного либо малинового цвета. Мертвые клетки остаются не окрашенными.

Для определения жизнеспособности зародышей клена (бархатистого, ложноплатанового, остролистного) используют 0,5%-й раствор тетразола (5 г на 1 л кипяченой воды). Окрашивание выполняют в темноте в течение 24 ч при температуре 30°С. При слабом окрашивании зародышей данный срок возможно продолжить до 48 ч при комнатной температуре.

При окрашивании тетразолом зародышей семян клена к жизнеспособным относят: а) всецело окрашенные; б) имеющие неокрашенные пятна на семядолях зародыша, не превышающие 1/3 их поверхности если они удалены от места прикрепления корешка; в) имеющие окрашенные семядоли и бледноокрашенные корешки и напротив; г) имеющие чуть заметную неокрашенную точку на кончике корешка.

Способ окрашивания йодистым раствором основан на окрашивании крахмала зародышей йодом.

Проверка качества зерна

Источник

Определение жизнеспособности семян основано на том что при повреждении растительной ткани

СЕМЕНА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ КУЛЬТУР

Методы определения жизнеспособности

Seeds of farm crops. Methods for determination of viability

Дата введения 1983-07-01

Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 9 июня 1982 г. N 2331 дата введения установлена 01.07.83

Ограничение срока действия снято по протоколу N 2-92 Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (ИУС 2-93)

ИЗДАНИЕ с Поправками (ИУС 8-83, 4-85, 7-87).

Настоящий стандарт распространяется на семена арбуза, баклажана, бобов кормовых, вики, гороха, гречихи, дыни, капусты, катрана степного, клевера лугового, клещевины, конопли, кукурузы, льна, люпина однолетнего, люцерны синей, нута, овса, огурца, перца, подсолнечника, пшеницы, редиса, ржи, риса, сои, томата, тыквы, фасоли, ячменя и устанавливает следующие методы определения жизнеспособности:

— окрашиванием семян индигокармином и кислым фуксином;

— по скорости набухания семян;

Методы применяют для получения быстрой информации о качестве семян, когда семена находятся в состоянии покоя или требуют длительного срока проращивания, и при оценке набухших, но непроросших семян после завершения установленного срока проращивания.

Термины и определения — по ГОСТ 20290-74.

1. МЕТОД ОТБОРА ОБРАЗЦОВ

1.1. Отбор образцов — по ГОСТ 12036-85.

1.2. Определение жизнеспособности проводят по двум пробам по 100 семян в каждой, отобранным из семян основной культуры, выделенных по ГОСТ 12037-81.

2. ТЕТРАЗОЛЬНО-ТОПОГРАФИЧЕСКИЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ СЕМЯН

Метод основан на способности дегидрогеназ живых клеток зародыша восстанавливать бесцветный раствор хлористого тетразола в фармазан. В результате зародыш таких семян приобретает красный (малиновый) цвет, зародыши мертвых семян остаются неокрашенными. Кроме полностью окрашенных и полностью не окрашенных, могут встречаться семена с частично окрашенными зародышами. По положению и размеру некротических пятен на зародыше семена классифицируют как жизнеспособные или нежизнеспособные.

2.1. Аппаратура, материалы и реактивы

2.1.1. Для проведения анализа применяют:

— весы лабораторные 1-4-го классов точности по ГОСТ 24104-80* с наибольшим пределом взвешивания до 200 г;

* С 1 июля 2002 г. введен в действие ГОСТ 24104-2001 (здесь и далее).

— термостаты обогреваемые и охлаждаемые с диапазоном регулирования температуры в рабочей камере от +3 °С до +35 °С, допустимые колебания температуры в рабочей камере ±2 °С;

— микроскоп биологический стереоскопический с увеличением от 3,5 до 88 ;

— лупу 7 увеличения;

— стаканчики химические или колбы вместимостью 50, 100, 1000 см по ГОСТ 23932-90;

— бумагу фильтровальную лабораторную по ГОСТ 12026-76;

— бумагу индикаторную для определения рН раствора;

— 2, 3, 5-трифенилтетразол-хлорид (тетразол хлористый);

— калий фосфорнокислый, однозамещенный (КН РО ), ч. по ГОСТ 4198-75;

— натрий фосфорнокислый двузамещенный (Na HPO ·2Н О), ч. по ГОСТ 11773-76;

— воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72;

* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51232-98 (здесь и далее).

(Поправка, ИУС 8-83).

2.1.2. Приготовление водного раствора тетразола

Для окрашивания зародышей используют 0,5%-ный водный раствор тетразола (5 г тетразола растворяют дистиллированной или свежекипяченой водой с pH 6,0-7,0 и доводят до объема 1000 см ). Если значение pH воды меньше 6 или больше 7, используют буферный раствор, который готовят следующим образом:

— раствор N 1 — растворяют 9,078 г КН РО в 1000 см дистиллированной воды;

— раствор N 2 — растворяют 11,876 г Na HPО ·2Н О в 1000 см дистиллированной воды.

Затем 400 см раствора N 1 и 600 см раствора N 2 смешивают вместе. В литре буферного раствора растворяют 5 г соли тетразола. Получают 0,5%-ный раствор хлористого тетразола, pH которого равен 7,0.

Читайте также:  Семя льна при беременности нельзя

(Поправки, ИУС 4-85, 7-87).

2.2. Подготовка к анализу

2.2.1. Семена замачивают в воде в течение 15-18 ч (на ночь) при температуре 20 °С, а свежеубранные семена — при температуре 10 °С — 15 °С в течение такого же времени.

Семена сои замачивают на 2-5 ч, льна — на 2 ч, клещевины — на 1 ч при температуре 30 °С. Допускается предварительно не замачивать семена, которые легко разрезаются, а также изменять срок замачивания семян.

2.3. Проведение анализа

2.3.1. Семена капусты, катрана, томата, перца, баклажана, редиса, конопли окрашивают целыми. Остальные семена разрезают вдоль на две половинки: зерновые — вдоль зародыша, зернобобовые, овощные, технические — на две семядоли вдоль корешка. Каждую подготовленную сотню половинок семян промывают несколько раз водой, полностью погружают в раствор тетразола и выдерживают в темноте. Температура и срок выдержки — в зависимости от культуры. Другая сотня половинок семян аннулируется. Обработанные семена (или половинки семян) после промывания водой раскладывают на пластинке или фильтровальной бумаге. Затем семена просматривают с помощью лупы, бинокуляра или невооруженным глазом (в зависимости от культуры и распространения некрозов), поддерживая их во влажном состоянии на протяжении всего исследования.

Каждое семя оценивается как жизнеспособное или нежизнеспособное в соответствии с чертежом окрашивания. Количество жизнеспособных семян подсчитывают. Жизнеспособные семена обозначены на чертежах знаком «+», нежизнеспособные — знаком «-«.

2.3.2. Анализ семян зерновых культур

2.3.2.1. Анализ семян ржи, пшеницы, ячменя, кукурузы

Половинки семян следует поместить в химический стаканчик с водой, промыть несколько раз для удаления остатков разрезанных тканей, залить раствором тетразола и оставить на 1 ч 30 мин при температуре 20 °С или на 40-50 мин при 30 °С.

При слабом окрашивании тканей зародыша время обработки необходимо продлить на 30-60 мин. Результаты окрашивания семян приведены в приложениях 1-4.

К жизнеспособным семенам ржи (см. приложение 1, черт.2) относят семена, у которых:

— зародыш полностью окрашен (черт.2а);

— зародыш с неокрашенным первым корешком (черт.2б);

— не окрашены структуры зародыша, не затрагивающие проводящие пучки (черт.2в).

К нежизнеспособным семенам ржи (см. приложение 1, черт.3) относят семена, у которых:

— зародыш полностью неокрашен (черт.3а);

— зародыш с неокрашенной корневой частью или почечкой (черт.3б, в);

— зародыш с неокрашенными корневой частью, почечкой и центральной частью (черт.3г);

— зародыш с неокрашенным щитком (черт.3д);

— зародыш с неокрашенной центральной частью, включая стеблевую и корневую меристемы (черт.3е);

— зародыш с неокрашенной почечкой и верхним концом щитка (черт.3ж);

— зародыш с неокрашенной почечкой и щитком (черт.3з);

— некрозы (части отмирающей, отмершей ткани) на жизненно необходимых частях зародыша: щитке, почечке и корневой части (черт.3и).

К жизнеспособным семенам пшеницы (см. приложение 2, черт.2) относят семена, у которых:

— зародыш полностью окрашен (черт.2а);

— некрозы на верхнем конце щитка и колеоризе (черт.2б).

К нежизнеспособным семенам пшеницы (см. приложение 2, черт.3) относят семена, у которых:

— зародыш полностью не окрашен (черт.3а);

— зародыш с неокрашенной корневой частью или почечкой (черт.3б);

— некрозы на нижнем и верхнем концах щитка, почечке, колеоризе и частично на корневой части (черт.3в);

— не окрашены почечка и кончики щитка (черт.3г);

— не окрашены щиток и колеориза (черт.3д);

— не окрашены щиток, почечка и колеориза (черт.3е);

— некрозы на жизненно необходимых частях зародыша — щитке, почечке и корневой части (черт.3ж);

К жизнеспособным семенам ячменя (см. приложение 3, черт.2) относят семена, у которых:

зародыш полностью окрашен (черт.2).

К нежизнеспособным семенам ячменя (см. приложение 3, черт.3) относят семена, у которых:

Источник

Определение жизнеспособности и доброкачественности семян

Цель работы: получить представление о жизнеспособности и доброка­чественности семян и научиться определять эти показатели.

Материалы: ГОСТ 13056.7—68, ГОСТ 13056.8—68; подготовленные к анализу семена яблони, ясеня обыкновенного, кедра сибирского, сосны обыкновенной, клена остролистного, желуди дуба; раствор индигокармина (0,05); раствор тетразолола. (0,5%); йодистый раствор, белая бумага.

Читайте также:  Выращивание рассады цветов на рассаду

Оборудование: разборные доски, препаровальные иглы, скальпели, лез­вия бритвы, баночки для окрашивания семян, вогнутые часовые стекла диа­метром 5—6 см, колбы с водой, пипетки, лупы, банки для отходов.

Определение жизнеспособности. Этот показатель качества характеризует процентное содержание живых семян в партии. Определяют его при длительном периоде прорастания семян, а также при необходимости срочного высева или отправки у се­мян с вынужденным покоем (лиственница, пихта сибирская, ряд сосен). Жизнеспособность семян определяют окрашиванием зародышей индигокармином, тетразолом, йодистым раствором в соответствии с техническими условиями ГОСТ 13056.7—68. «Методы определения жизнеспособности». Этот ГОСТ учащиеся используют на занятиях в качестве методического пособия. От фракции чистых семян подряд отбирают 3—4 пробы по 100 семян. На случай замены поврежденных при извлечении зародышей дополнительно отсчитывают не менее 50 семян. После на­мачивания до полного набухания семена каждой пробы отдельно взрезывают малым скальпелем или глазным копьем для извлечения зародыша. При этом учитывают число обнару­женных в каждой пробе недоброкачественных семян (пустых и беззародышевых, поврежденных вредителями, загнивших), а также число зародышей, подлежащих окрашиванию. Для за­мены поврежденных при извлечении из семени зародышей взрезывают семена из резерва. Обнаруженные при анализе про­бы недоброкачественные семена замене не подлежат. Их учиты­вают и записывают в карточку анализа семян.

Извлеченные зародыши отдельно по каждой пробе помеща­ют в воду или на влажную фильтровальную бумагу во избежа­ние их высыхания. Перед окрашиванием воду сливают или от­сасывают и зародыши заливают раствором определенного кра­сителя. По истечении срока окрашивания раствор красителя сливают. Зародыши промывают водой, раскладывают на белую поверхность и сразу же учитывают по характеру окрашивания их число жизнеспособных и нежизнеспособных семян. Получен­ные результаты заносят в соответствующий раздел карточки анализа (табл. 6). При окрашивании йодистым раствором жиз­неспособными считают окрашенные зародыши. Для записи ре­зультатов анализа в этом случае следует внести коррективы в структуру таблицы.

Жизнеспособность и все категории нежизнеспособных семян вычисляют как среднее арифметическое результатов окрашива­ния проб, взятых для анализа, с учетом допустимых расхожде­ний между этими результатами. Рассчитанные показатели выражают в процентах.

При планировании времени лабораторных занятий необхо­димо учитывать длительность сроков окрашивания зародышей (в растворе индигокармина — 2 ч, тетразола — 24 ч, в йодистом растворе — 0,5 ч). Определение жизнеспособности семян — тру­доемкий процесс, поэтому для экономии времени каждую сот­ню семян анализируют 2—4 учащихся.

Определение доброкачественности. Этот показатель опреде­ляют в соответствии с ГОСТ 13056.8—68 по числу полнозерни­стых здоровых семян с характерной для данного вида окраской зародыша и эндосперма, выраженному в процентах от общего числа семян, взятых для анализа. Анализируют семена с дли­тельным периодом прорастания, для которых методы определе­ния всхожести и жизнеспособности не установлены. Кроме этого, относительная простота метода определения доброкачест­венности позволяет использовать его при внутрихозяйственном контроле за качеством семян. Например, качество семян дуба и каштана определяют таким методом чаще непосредственно в хозяйствах, заготовивших эти семена.

Для определения доброкачественности предварительно под­готовленные семена (намоченные, выдержанные во влажном песке) взрезывают острым скальпелем или лезвием бритвы вдоль зародыша и в соответствии с техническими условиями (приложение к ГОСТ 13056.3—68) по цвету, упругости и дру­гим внешним признакам определяют их состояние (доброкаче­ственные или нет). Семена всех видов дуба взрезают сухими, семена всех видов боярышника, каштана, ореха — сухими или предварительно намоченными. Это объясняется достаточно вы­сокой естественной влажностью семян вышеуказанных пород.

Для определения доброкачественности из фракции чистых семян отсчитывают подряд четыре пробы по 100 семян, для се­мян всех видов дуба, каштана, ореха — три пробы по 100 семян в каждой. При взрезывании семян по каждой пробе отдельно учитывают число доброкачественных и недоброкачественных семян, в том числе пустых, беззародышевых, поврежденных вре­дителями, загнивших. Результаты исследования заносят в кар­точку анализа (табл. 7). В рассматриваемом примере доброкачественность исследуемых семян клена остролистного составля­ет 89%. Показатель определен как среднее арифметическое ре­зультатов исследования четырех проб при допустимом расхож­дении между ними.

На лабораторных занятиях учащиеся могут определять доброкачественность семян четырех-пяти пород (дуба, клена остролистного, ясеня обыкновенного и еще одной-двух пород — по усмотрению преподавателя). По каждой породе взрезывают 25 семян. Результаты исследования по одной из пород фиксиру­ются в документах, по остальным породам — просматриваются руководителем занятия.

Источник